當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>小鼠源細(xì)胞>> 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5操作步驟
雜交瘤細(xì)胞株;1H7F8實(shí)驗(yàn)方法
細(xì)胞名稱 雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5操作步驟
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
綿羊孕酮受體(PGR)免疫試劑盒 Sheep progesterone receptor,PGR ELISA Kit
綿羊孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒 Sheep Progesterone,PROG ELISA Kit
綿羊游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)免疫試劑盒 Sheep free tri-iodothyronine indes,FT3 ELISA kit
綿羊游離甲狀腺素(FT4)免疫試劑盒 Sheep free thyroxine,FT4 ELISA kit
綿羊胰島素樣因子1(IGF-1)免疫試劑盒 Sheep insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit
綿羊胰島素(INS)免疫試劑盒 Sheep Insulin,INS ELISA Kit
綿羊一氧化氮合成酶2,誘導(dǎo)型(NOS2)免疫試劑盒 Sheep nitric oxide synthase 2,inducible(NOS2)ELISA kit
綿羊血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒 Sheep Serum Amyloid A,SAA ELISA Kit
綿羊血管生成素2(ANG-2/ANGPT2)免疫試劑盒 Sheep angiopoietin 2,ANG-2/ANGPT2 ELISA kit
綿羊褪黑素(MT)免疫試劑盒 Sheep Melatonin,MT ELISA Kit
綿羊銅藍(lán)蛋白(CP)免疫試劑盒 Sheep Ceruloplasmin,CP ELISA Kit
綿羊甜菜堿-同型半胱氨酸S-甲基轉(zhuǎn)移酶1(BHMT)免疫試劑盒 Sheep Betaine--homocysteine S-methyltransferase 1,BHMT ELISA kit
綿羊髓過氧化物酶(MPO)免疫試劑盒 Sheep myeloperoxidase,MPO ELISA kit
高爾基體蛋白A3(GOLGA3)ELISA試劑盒 ,英文名: GOLGA3 ELISA Kit
封閉蛋白25(CLDN25)ELISA試劑盒 ,英文名: CLDN25 ELISA Kit
封閉蛋白24(CLDN24)ELISA試劑盒 ,英文名: CLDN24 ELISA Kit
封閉蛋白10(CLDN10)ELISA試劑盒 ,英文名: CLDN10 ELISA Kit
封閉蛋白1(CLDN1)ELISA試劑盒 ,英文名: CLDN1 ELISA Kit
糞卟啉原氧化酶(CPOX)ELISA試劑盒 ,英文名: CPOX ELISA Kit
分泌型磷蛋白2(SPP2)ELISA試劑盒 ,英文名: SPP2 ELISA Kit
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5操作步驟分泌球蛋白家族2A成員2(SCGB2A2)ELISA試劑盒 ,英文名: SCGB2A2 ELISA Kit
分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)ELISA試劑盒 ,英文名: SCG5 ELISA Kit
分泌粒蛋白Ⅲ(SCG3)ELISA試劑盒 ,英文名: SCG3 ELISA Kit
分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)ELISA試劑盒 ,英文名: SCG2 ELISA Kit
分泌跨膜蛋白1(SECTM1)ELISA試劑盒 ,英文名: SECTM1 ELISA Kit
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