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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T氣腫疽梭菌(CC)熒光-PCR法檢測試劑盒

氣腫疽梭菌(CC)熒光-PCR法檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-07-23 15:31:41瀏覽次數(shù):119次

陳小姐

銷售部
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氣腫疽梭菌(CC)熒光-PCR法檢測試劑盒客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。

具有下列特點:
1.
即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2.
引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp
3. PCR mix
中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4.
提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。

產(chǎn)品名稱

氣腫疽梭菌(CC)熒光-PCR法檢測試劑盒

規(guī)格

50T

貨號

CP99929

PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴增。
其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93-94)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。

特點優(yōu)勢:
1.
特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.   
優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列最好有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
1049743-58-9  PS 1145 dihydrochloride  5mg  哺乳動物源性成分LAMP試劑盒  種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20

1049747-87-6  SB-242084 (hydrochloride)  10mg  鱈魚源性成分LAMP試劑盒  種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20

1049747-87-6  SB-242084 (hydrochloride)  1mg  動物源性成分(18S)LAMP試劑盒  種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20

1049747-87-6  SB-242084 (hydrochloride)  5mg  鱈魚源性成分LAMP試劑盒  種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20

104-98-3  Urocanic acid  1g  金槍魚源性成分LAMP試劑盒  種源性檢測/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  20
異丙基伊曲康唑質(zhì)量規(guī)格:美國進口Isopropyl Itraconazole  英文名稱MouseActivinAELISAKit小鼠活化素A(ActivinA)規(guī)格:96T/48T  大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

噴托維林質(zhì)量規(guī)格:美國進口Carbetapentane  冰凍切片核酸氧化8-氧脫氧鳥苷(8-oxo-dG)熒光染色測定試劑盒10  人細胞色素c氧化酶Ⅵα亞基多肽1(COX6A1)試劑盒 Human cytochrome c oxidase subunit VIa polypeptide 1,COX6A1 ELISA kit

卡洛芬乙酯 (卡洛芬雜質(zhì))質(zhì)量規(guī)格:美國進口Carprofen Ethyl Ester (Carprofen Impurity)  RatAngiogenin,ANGELISA試劑盒大鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  谷酸合成酶(GOGAT)測試盒 紫外分光光度法 50/48

外消旋卡洛芬-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口rac Carprofen-d3  小鼠NADPH氧化酶1(NOX1)ELISA試劑盒 ,英文名: NOX1 ELISA Kit  RatOncostatin-M,OSMELISA試劑盒大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氣腫疽梭菌(CC)熒光-PCR法檢測試劑盒THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)CHAPSO3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級;CHAPSO

人張氏肝細胞;Chang liver 人上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL二硫赤蘚醇(DTE);1,4-二硫代赤蘚醇質(zhì)量規(guī)格:>99%,進分sigma1,4-Dithioerythritol

Saos-2,人成骨肉瘤細胞精噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Fenoxaprop-P

ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-羥基煙酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.0%(HPLC)6-Hydroxynicotinic Acid

人胚肺成纖維細胞;MRC-5正庚醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%GC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%GC)1-Heptanol
熒光定量PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。


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