當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T星狀病毒和札如病毒熒光PCR法檢測試劑盒
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:星狀病毒和札如病毒熒光PCR法檢測試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
貨號:CP99328
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
110231-30-6 DPPP 5mg Ornithostrongylus quadriradiatus四輻射鳥圓線蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
110231-34-0 Oligomycin E 1mg Trichinella spiralis旋毛蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
110231-34-0 Oligomycin E 5mg Trichinella pseudospiralis偽旋毛蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
110241-23-1 Ganoderenic acid E 1mg Trichinella pseudospiralis偽旋毛蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
110241-23-1 Ganoderenic acid E 5mg Trichinella papuae巴布亞旋毛蟲LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度
溴化鉀(光譜SP)質(zhì)量規(guī)格:光譜SPPotassium bromide PorcineIerferonβ,IFN-β/IFNBELISA試劑盒豬β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒 ,英文名: SPA ELISA Kit
偶氮胂Ⅰ水合物(90%)質(zhì)量規(guī)格:0.9Arsenazo I Hydrate 小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 ,英文名: Cr ELISA Kit rabbitIerleukin8,IL-8ELISA試劑盒兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
無水硫酸鈉(SP)質(zhì)量規(guī)格:SP sulfate anhydrous 大鼠抗心1脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA檢測試劑盒Ratai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit 96T/48T Humanai-teichoicacidaibody,TAELISA試劑盒人抗1壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
二甲基砜(核磁共振定量標準品)質(zhì)量規(guī)格:核磁共振定量標準品Dimethyl sulfone 人胞漿型1脂酶A2-α(cPLA2-α)試劑盒 Human cytosolic phospholipase A2-α,cPLA2-α ELISA Kit HumanclusterOfdiffereiation,CDl4ELISAKit人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
星狀病毒和札如病毒熒光PCR法檢測試劑盒CLEC14A Others Mouse 小鼠 CLEC14A / EGFR-5 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢哌酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Cefoperazone Acid
倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11羅丹明6G/堿性紅1/玫瑰紅6G質(zhì)量規(guī)格:BSRhodamine 6G
IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) 維多利亞藍B,堿性藍 26質(zhì)量規(guī)格:BSVictoria blue B
WM451, 人色素瘤細胞考馬斯亮藍R250質(zhì)量規(guī)格:BSBrilliant Blue R
HPB-ALL細胞,T細胞白血病細胞 人前列腺癌細胞高轉(zhuǎn)移亞系,PC-3M 1E8細胞 人心臟成纖維細胞總RNAHCF NA考馬斯亮藍G250質(zhì)量規(guī)格:BSBrilliant Blue G
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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