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細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
人小腸粘膜上皮細胞直銷 | T25m2 | CS-963721 |
人小腸粘膜上皮細胞【Human Intestinal: Normal Intestinal Mucosa Epithelial Cells】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 蛇床子素 Osthole 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA檢測試劑盒Mousemaixmetalloproteinase13,MMP-13 96T/48T 麝香酮(標準品) Muscone 質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,標準品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP13 ELISA Kit 升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標準品) Cimigenol-3-O-β-D-xylpyranoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP-13 ELISA Kit 升麻素(標準品) Cimifugin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶14(MMP14)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP14 ELISA Kit 升麻素苷(標準品) Prim-O-glucosylcimifugin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP15 ELISA Kit 升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷(標準品) Cimigenol-3-O-α-L-arabinoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶19(MMP19)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP19 ELISA Kit 圣草苷(標準品) Eriocitrin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP2 ELISA Kit 圣草酚(標準品) Eriodictyol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 石斛堿(標準品) Dendrobine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標準品
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit 石榴皮鞣素(標準品) Punicalin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA檢測試劑盒MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 96T/48T 別育享賓 HPLC≥98% 20mg
人含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)試劑盒 Human Tie-2 ELISA Kit ()南燭木樹脂酚 HPLC≥98% 20mg
Ratdopamine,DAELISAKit大鼠多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 利血平酸甲酯 HPLC≥98% 20mg
40%ACRYLAMIDE溶液500毫升 利血那明 HPLC≥98% 20mg
MouseErythropoietin,EPOELISA試劑盒小鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 阿嗎定 HPLC≥95% 20mg
小鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒 ,英文名: Pepsin ELISA Kit 利血平氮氧化物 HPLC≥95% 20mg
小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA檢測試劑盒MouseE-Cadherin,E-CadELISAKit 96T/48T ,二甲氧基二苯乙烯 HPLC≥95% 20mg
人含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)試劑盒 Human Tie-1 ELISA Kit ,二氫H吡喃酮 HPLC≥95% 20mg
RatEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit大鼠腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 刺五加皂苷E HPLC≥95% 20mg
48孔板細胞基因組DNA分離試劑盒10 前胡E HPLC≥95% 20mg
人小腸粘膜上皮細胞直銷Ratgrowthhormone,GHELISAKit大鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻素(標準品) Cimifugin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Ratgrowthhormone,GHELISA試劑盒大鼠生長激素(GH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻素 HPLC≥98% 20mg
ratgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻環(huán)氧醇苷 HPLC≥98% 5mg
ratgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA試劑盒大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻醇OβD吡喃木糖苷 HPLC≥98% 10mg
RatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷(標準品) Cimigenol-3-O-β-D-xylpyranoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
RatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISA試劑盒大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 腎臟髓質(zhì)肽(22-52),人 Adrenomedullin (22-52),human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Ratgrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 腎上腺色腙(卡巴克洛)標準品 Carbazochrome 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
Ratgrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISA試劑盒大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 神經(jīng)肽Y(3-36),豬 Neuropeptide Y (3-36)(porcine) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
RatHaptoglobin,Hpt/HPELISAKit大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 神經(jīng)肽Y(2-36),人,大鼠 Neuropeptide Y (2-36) (human,rat) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
RatHaptoglobin,Hpt/HPELISA試劑盒大鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 神經(jīng)肽Y(22-36) Neuropeptide Y (22-36) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
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