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上海莼試生物技術有限公司
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當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養(yǎng)>>原代細胞>> T25m2人臍動脈內皮細胞操作

人臍動脈內皮細胞操作

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號T25m2

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-19 19:25:43瀏覽次數:150次

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人臍動脈內皮細胞操作收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37,5%CO2培養(yǎng)。

產品名稱

人臍動脈內皮細胞操作

規(guī)格

T25m2

貨號

CS-963732

人臍動脈內皮細胞【Human Aortic: Normal Aortic Smooth Muscle Cells產品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 ,5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
血液乙脫氫酶3活性比色法定量檢測試劑盒20 3A-氨基-3A-脫氧-(2AS,3AS)-γ-環(huán)糊精水合物(>95.0%(HPLC))  3A-Amino-3A-deoxy-(2AS,3AS)-γ-cyclodextrin Hydrate  質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)

鴨γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒DuckIerferonγ,IFN-γ 96T/48T 6-O-α-D-麥芽糖基-β-環(huán)糊精(>98.0%(HPLC))  6-O-α-D-Maltosyl-β-cyclodextrin  質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

鴨白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin1,IL-1 96T/48T -β-環(huán)糊精(>98.0%(HPLC))  Trimethyl-β-cyclodextrin  質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

鴨白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin2,IL-2 96T/48T 三乙酰基-β-環(huán)糊精(>97.0%(HPLC))  Triacetyl-β-cyclodextrin  質量規(guī)格:>97.0%(HPLC)

鴨白介素4(IL-4)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin-4,IL-4 96T/48T 10,12-二十七二炔酸(>98.0%(GC))  10,12-Heptacosadiynoic Acid  質量規(guī)格:>98.0%(GC)

鴨白介素6(IL-6)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin6,IL-6 96T/48T 2,4-十七二炔酸(>95.0%(T))  2,4-Heptadecadiynoic Acid  質量規(guī)格:>95.0%(T)

鴨白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin-8,IL-8 96T/48T 2,4-二十一二炔酸(>95.0%(T))  2,4-Heneicosadiynoic Acid  質量規(guī)格:>95.0%(T)

鴨病毒性腸炎病毒(DEV)ELISA檢測試劑盒Duckviruseeritis,DEV 96T/48T 10,12-十七二炔酸(>97.0%(T))  10,12-Heptadecadiynoic Acid  質量規(guī)格:>97.0%(T)

鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISA檢測試劑盒Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHC 96T/48T 10,12-二十九二炔酸(>97.0%(T))  10,12-Nonacosadiynoic Acid  質量規(guī)格:>97.0%(T)

乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA檢測試劑盒Monkeyacetylcholinereceptoraibody,AChRab 96T/48T 2,4-十九二炔酸(>97.0%(T))  2,4-Nonadecadiynoic Acid  質量規(guī)格:>97.0%(T)
Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O('E,'E癸二烯?;?/span>)O乙酰巨大戟二萜醇 HPLC95% 20mg

50Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升 O('E,'Z癸二烯酰基)巨大戟二萜醇 HPLC95% 20mg

Mouseferritin,FEELISA試劑盒小鼠鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T O('E,'E癸二烯?;?/span>)巨大戟二萜醇 HPLC95% 20mg

小鼠維生素A(VA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 巖大戟內酯A HPLC95% 20mg

Rat osteonectin (ON) ELISA Kit 大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 巖大戟內酯E HPLC95% 20mg

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPαELISAKit CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝 大戟因子L HPLC95% 20mg

ChickenLeinizingHormone,LHELISA試劑盒雞促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大戟因子La HPLC95% 20mg

載玻片細胞NFKAPPABP50蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20 大戟因子L HPLC95% 20mg

MouseFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit小鼠游離狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 大戟因子L HPLC95% 20mg

小鼠維X受體α(RXRα)ELISA試劑盒 ,英文名: RXRα ELISA Kit 異山柰素 HPLC95% 20mg
人臍動脈內皮細胞操作RatIerleukin21,IL-21ELISAKit大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 殺螟丹標準溶液(100μg/ml,u=3%)  Aramite solution  質量規(guī)格:100μg/ml,u=3%

RatIerleukin21,IL-21ELISA試劑盒大鼠白介素21(IL-21)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 殺螟丹(標準品)  Aramite  質量規(guī)格:分析標準品,99%

RatIerleukin23,IL-23ELISAKit大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 殺蟲脲(標準品)  Triflumuron  質量規(guī)格:分析標準品

RatIerleukin23,IL-23ELISA試劑盒大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 殺蟲單(標準品)  Thiosultap di  質量規(guī)格:分析標準品

RatIerleukin27,IL-27ELISAKit大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色瑞替尼,LDK378  Ceritinib;LDK-378  質量規(guī)格:>98%,ALK抑制劑

RatIerleukin27,IL-27ELISA試劑盒大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色甘酸鈉(標準品)  Cromolyn   質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAKit大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色甘酸鈉  Cromolyn   質量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細胞培養(yǎng)

RatIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒大鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色酚AS醋酸鹽(>98%,BC)  Naphthol AS acetate  質量規(guī)格:>98%,BC

RatIerleukin3,IL-3ELISAKit大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色胺(>98%,BR)  Tryptamine  質量規(guī)格:>98%,BR

RatIerleukin3,IL-3ELISA試劑盒大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 色胺 HPLC98% 20mg

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