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我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規(guī)范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠肺動脈成纖維細胞直銷 | T25m2 | CS-963865 |
大鼠肺動脈成纖維細胞【Rat Lung: Normal Artery Fibroblasts】產(chǎn)品描述:提供的原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時電話或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)大鼠甘肽/甘素(GAL)ELISA檢測試劑盒Ratgalanin,GAL 96T/48T 馬賽替尼 Masitinib 質(zhì)量規(guī)格:>98%
大鼠肝脂酶(HL)ELISA檢測試劑盒Rathepaticlipase,HL 96T/48T 美西林/氮脒青霉素 Mecillinam 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISA檢測試劑盒Ratulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSH 96T/48T 甲羥孕酮/安宮黃體素 Medroxyprogesterone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityThyroxine,u-T4 96T/48T 甲羥孕酮(標準品) Medroxyprogesterone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
大鼠高敏狀腺原氨酸(u-T3)ELISA檢測試劑盒RatUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3 96T/48T 甲巰咪唑/他巴唑/2-巰基-1-咪唑 Methimazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP 32
大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA檢測試劑盒RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1 96T/48T 甲巰咪唑(標準品) Methimazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
大鼠(T)ELISA檢測試劑盒RatTestoterone,T 96T/48T 美索巴莫 Methocarbamol 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP 32
大鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA檢測試劑盒RatLebtospiraIgG 96T/48T 美索巴莫(標準品) Methocarbamol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA檢測試劑盒RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/N 96T/48T 潑尼松龍 Methylprednisolone 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-Ab 96T/48T 潑尼松龍(標準品) Methylprednisolone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97.5%,標準品
人干擾素活化基因205(Ifi205)試劑盒 human ierferon activated gene 205,Ifi205 ELISA Kit 羅丹明6G/堿性紅1/玫瑰紅6G Rhodamine 6G 質(zhì)量規(guī)格:BS
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B Sulforhodamine B 質(zhì)量規(guī)格:BS
C.guilliermondiiRFLP基因分析試劑盒20 麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B Sulforhodamine B 質(zhì)量規(guī)格:BS
MouseLeptinSolubleReceptor,sLRELISA試劑盒小鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 氯化羅丹明110;羅丹明110 Rhodamine 110 chloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%
小鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒 ,英文名: β-CG ELISA Kit 羅丹明123 Rhodamine 123 質(zhì)量規(guī)格:用于熒光標記
小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA檢測試劑盒Mousesolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAkit 96T/48T 曲美布汀堿 Trimebutine base 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人干擾素調(diào)節(jié)因子8(IRF8)試劑盒 Human IRF8 ELISA Kit 6-羧基四羅丹明;6-TAMRA 6-Carboxytetramethylrhodamine 質(zhì)量規(guī)格:≥90%;for fluorescence
RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 6-羧基四羅丹明琥珀酯,6-TAMRA, SE 6-TAMRA, SE 質(zhì)量規(guī)格:用于熒光標記
C.kruseiRFLP基因分析試劑盒20 卵清蛋白;雞蛋白蛋白 Ovalbumin/Egg albumins 質(zhì)量規(guī)格:BR,80~90%
MouseLeptin,LEPELISA試劑盒小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 米替福新 Miltefosine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠肺動脈成纖維細胞直銷大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA檢測試劑盒Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit 96T/48T 沒食子?;鼘幩?/span> HPLC≥95% 20mg
大鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒 Rat prostate specific aigen,PSA ELISA Kit 沒食子?;鼘幩?/span> HPLC≥95% 20mg
大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA檢測試劑盒RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit 96T/48T 沒食子?;鼘幩?/span> HPLC≥95% 20mg
大鼠前心肽(Pro-ANP)試劑盒 Rat Pro Aial Naiuretic Peptide,Pro-ANP ELISA Kit 沒食子酸月桂酯(>98.5%,BR) Dodecyl gallate 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
大鼠潛伏轉(zhuǎn)化生長因子結(jié)合蛋白1(LTBP1)試劑盒 Rat Late-ansforming growth factor beta-binding protein 1,LTBP1 ELISA kit 沒食子酸乙酯 HPLC≥98% 20mg
大鼠強啡肽(Dyn)試劑盒 Rat dynorphin,Dyn ELISA Kit 沒食子酸乙酯 Ethyl gallate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠羥戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)試劑盒 Rat Hydroxymethylglaryl CoA,HMG-CoA ELISA kit 沒食子酸一水物(標準品) Gallic acid monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
大鼠羥戊二酸單酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)試劑盒 Rat Hydroxymethylglaryl CoA Reductase,HMG-CoAR ELISA kit 沒食子酸一水物 Gallic acid monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,AR
大鼠羥脯氨酸(Hyp)ELISA檢測試劑盒Rathydroxyproline,HypELISAKit 96T/48T 沒食子酸辛酯 HPLC≥98% 20mg
大鼠羥脯氨酸(Hyp)試劑盒 Rat hydroxyproline,Hyp ELISA Kit 沒食子酸甲酯(>98%,BC) Methyl gallate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。
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