我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種，細胞庫管理規(guī)范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和*培養(yǎng)條件。純度可達 90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

大鼠心肌成纖維細胞【Rat Heart: Normal Heart Fibroblasts】產品描述：提供的原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在生物技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程，保證細胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、售后服務標準。
保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。
細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法：
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術指導，請及時電話或郵件聯(lián)系。
一．貼壁細胞
客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯至80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO2  培養(yǎng)。
二．懸浮細胞
1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。
5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO2  培養(yǎng)化微粒體0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性比色法定量檢測試劑盒20 醋酸氟輕松;醋酸膚輕松(標準品)  Fluocinolone Acetonide  質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

化微粒體0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性熒光定量檢測試劑盒20 馬來酸氟吡汀  Flupirtine maleate  質量規(guī)格：>98%

化細胞色素C氧化酶活性測定試劑盒20 馬來酸氟吡汀(標準品)  Flupirtine maleate  質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

化線粒體0氧比(ADP/O)定量檢測試劑盒20 氟維司群  Fulvestrant  質量規(guī)格：>99%,進分,ER(雌激素受體)拮抗劑

化線粒體DNA/RNA同步萃取試劑盒20 孕二烯酮  Gestodene  質量規(guī)格：>99%

化線粒體DNA萃取試劑盒20 孕二烯酮(標準品)  Gestodene  質量規(guī)格：>99%,標準品

化線粒體DNA萃取試劑盒20 海沙瑞林  Hexareline  質量規(guī)格：>98%

化線粒體II型L-3羥酰基-CoA脫氫酶/β淀粉樣蛋白結合乙醇脫氫酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量檢測試劑盒20 伊潘立酮  Iloperidone  質量規(guī)格：>98%,可用于細胞培養(yǎng)

化線粒體NADH氧化酶活性定量檢測試劑盒20 伊潘立酮(標準品)  Iloperidone  質量規(guī)格：>98%,標準品

化線粒體蛋白質濃度定量測定試劑盒20 亞胺培南  Imipenem monohydrate  質量規(guī)格：>98%,BR
大鼠壞死因子相關凋亡誘導配體受體4(AIL-R4)試劑盒 Rat AIL-R4 ELISA Kit 那格列奈（標準品）  Nateglinide  質量規(guī)格：HPLC>99%,標準品

英文名稱humanBeta-EndorphinELISAKIT人β-內啡肽(Beta-Endorphin)ELISAKIT規(guī)格：96T/48T 那格列奈  Nateglinide  質量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

動物組織P型ATP酶(PtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20 那格列奈  Nateglinide  質量規(guī)格：>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

Ratβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISA試劑盒大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 丁東莨菪堿    "(-)scopolamine N-butyl bromide "  質量規(guī)格：>98%,BR

小鼠趨化因子C-X-C-基元受體3(CXCR3)ELISA試劑盒 ，英文名： CXCR3 ELISA Kit 單寧酸,鞣酸,丹寧酸  Tannic acid  質量規(guī)格：AR,98%

豬壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 96T/48T 馬拉韋若  Maraviroc  質量規(guī)格：>99%

大鼠壞死因子相關凋亡誘導配體受體3(AIL-R3)試劑盒 Rat AIL R3 ELISA Kit 群勃龍醋酸酯   Revalor-H Trenbolone acetate  質量規(guī)格：>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

英文名稱HumanAmyloid-β-Protein(1-40)ELISAKit人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)規(guī)格：96T/48T 水飛薊賓(標準品)  Silibinin  質量規(guī)格：HPLC>97%，標準品

動物組織S9組分分離試劑盒50 水飛薊賓  Silibinin  質量規(guī)格：>97%,BR

Ratβ-Defensins,β-DFELISA試劑盒大鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 依澤替米貝;依折麥布  Ezetimibe  質量規(guī)格：>99%
大鼠心肌成纖維細胞操作大鼠糖原0酸化酶(GP)試劑盒 Rat glycogen phosphorylase,GP ELISA Kit 氯唑沙宗  Chlorzoxazone  質量規(guī)格：>98.5%,BR

大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA檢測試劑盒RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T 氯茚滿 HPLC≥98% 20mg

大鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA Kit 氯氧化鋯八水(>98%,BC)  Zirconium (IV) oxide chloride octahydrate  質量規(guī)格：>98%,BC

大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA檢測試劑盒RatGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 96T/48T 氯亞鉑酸鉀   Dipotassium tetrachloroplatinate  質量規(guī)格：BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉度＞99.95%

大鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA檢測試劑盒RatGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 96T/48T 氯硝柳胺(標準品)  Niclosamide  質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

大鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)試劑盒 Rat Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit 氯硝柳胺  Niclosamide  質量規(guī)格：>99%,BR

大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA檢測試劑盒Ratglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 96T/48T 氯替潑諾(標準品)  Loteprednol Etabonate  質量規(guī)格：HPLC>99.0%,標準品

大鼠糖原合成酶激酶(GSK)試劑盒 Rat glycogen syhase kinase,GSK ELISA Kit 氯替潑諾  Loteprednol Etabonate  質量規(guī)格：>99.0%

大鼠糖原合成酶激酶3α(GSK3A)試劑盒 Rat glycogen syhase kinase 3 alpha,GSK3A ELISA kit 氯舒隆(標準品)  Clorsulon  質量規(guī)格：>98%,標準品

大鼠糖原合成酶試劑盒 Rat glycogen syhetase ELISA Kit 氯舒隆  Clorsulon  質量規(guī)格：>98%,BR
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。