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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR試劑盒>>熒光定量PCR試劑盒>> 50T人皰疹病毒6型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

人皰疹病毒6型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-06-08 09:55:17瀏覽次數(shù):237次

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人皰疹病毒6型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。

人皰疹病毒6型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專(zhuān)門(mén)的區(qū)域操作。

產(chǎn)品名稱(chēng)

人皰疹病毒6型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

英文名稱(chēng)

Human Herpesvirus-6B(HHV-6B)6B

貨號(hào)

CP914462

 

儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),產(chǎn)品僅用于科研請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
相對(duì)定量簡(jiǎn)介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡(jiǎn)單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中與*的兩種相對(duì)定量方法之一

樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

Elastase彈性硬朊酶5克BR,400u/mg

EGF鼠頜下腺表皮生長(zhǎng)因子5克BR,99.5%

EDTA-MgNa2EDTA二鎂四水物1克BR,

EDTA-MgNa2EDTA二鎂5克BR,

EDTA-FeNaEDTA鐵5克生物技術(shù)級(jí),

EDTA-3KEDTA三鹽二水合物100克高純,73%

EDTA-2NaCa二四鈣二5克BR,50%

EDTA-2Na四二基1克BR,99%

EDTA-2K二四25克高純,73%

EDTA,3NaN,N’-1,2-基雙[N-(羧基)-甘]三鹽5克GR,99.5%

EDTA tetrasodium saltEDTA四鹽10克BR,

EDTA四二基1克BR,,≥10萬(wàn)IU/g

EDOT3,4-撐二氧10克2N,99%

EDDAB十二基基二基溴化銨25毫克BS

EDAC•HC11-基-(3-二基基基)二亞鹽鹽100毫克高純,99%

丹芝醇B  英文名稱(chēng):Ganoderol B  號(hào):104700-96-1  規(guī)格:5mg

番石榴苷  英文名稱(chēng):Guaijaverin  號(hào):22255-13-6  規(guī)格:20mg

異鼠李素-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷 (90%)  英文名稱(chēng):  Isorhamnetin 3-sophoroside-7-rhamnoside  號(hào):41328-75-0  規(guī)格:5mg

山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷  (85%)  英文名稱(chēng):Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside  號(hào):93098-79-4  規(guī)格:5mg

異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷  英文名稱(chēng):Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside  號(hào):17331-71-4  規(guī)格:5mg

3"-O-甲基表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酯  英文名稱(chēng):(-)-EGCG-3''-O-Me  號(hào):83104-87-4  規(guī)格:5mg

丹葉大黃素  英文名稱(chēng):Rhapontigenin  號(hào):500-65-2  規(guī)格:20mg

白皮杉醇  英文名稱(chēng):(E)-Piceatannol  號(hào):10083-24-6  規(guī)格:20mg

N-反式-對(duì)酰酪胺  英文名稱(chēng):N-p-Coumaroyl-tyramine  號(hào):36417-86-4  規(guī)格:10mg

N-反式-對(duì)-?;ゼ仔粮チ? 英文名稱(chēng):N-p-Coumaroyloctopamine  號(hào):66648-45-1  規(guī)格:10mg
人皰疹病毒6型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒Cyclopena[fg]racene-1,2-dione 環(huán)戊[fg]并四苯-1,2-二酮 規(guī)格:含量測(cè)定

Dibenz[a,h]anhracene 二苯并[a,h]蒽(>95.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

Dibenzo[b,def]chrysene 二苯并[b,def]芘(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

1,2:8,9-Dibenzopenacene 1,2:8,9-二苯并五苯 規(guī)格:含量測(cè)定

Dibenzo[g,p]chrysene 二苯并[g,p]稠二萘(>98.0%(HPLC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

Isoviolanhrone 異蒽酮紫 規(guī)格:含量測(cè)定

2-Mehylcyclopena[l]phenanhrene 2-甲基環(huán)戊[I]菲(>97.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

Naphho[2,3-a]pyrene 萘[2,3-a]芘(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

2-Chlorophenohiazine 2-氯吩噻嗪(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-riazine 2-氯-4,6-二-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

Indanhrone 陰丹酮 規(guī)格:含量測(cè)定

Julolidine 久洛尼定(>97.0%(GC)()) 規(guī)格:含量測(cè)定

9-Julolidinecarboxaldehyde 9-醛基久洛尼定(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

9,10-Phenanhrenequinone 9,10-菲醌(>99.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

Phenanhridine 菲啶(>98.0%(GC)) 規(guī)格:含量測(cè)定

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