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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>公司動(dòng)態(tài)>>原代細(xì)胞被菌種污染后的補(bǔ)救方法
實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的原代細(xì)胞污染通常是細(xì)菌以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌多見(jiàn),以及霉菌,黑蛟蟲(chóng),支原體和真菌。其中真菌Z難發(fā)現(xiàn)污染,也Z難處理,而霉菌和支原體等不是雙抗能解決的。
小編曾經(jīng)遇到貼壁細(xì)胞污染,經(jīng)病原微生物的老師鑒定是金葡菌污染所致,處理方法和樓主大同小異,但相對(duì)簡(jiǎn)便,Z后把從ATCC購(gòu)買的原代細(xì)胞救過(guò)來(lái)了。
小編簡(jiǎn)單把自己的操作步驟整理下,分享給大家:
1.倒掉培養(yǎng)液,用火烤瓶口和瓶蓋大約1分鐘
2.用大量的PBS反復(fù)沖洗,每次約30ML,重復(fù)5次
注意:在用火烤瓶口和瓶蓋(如果是一次性培養(yǎng)瓶 時(shí)間不能太長(zhǎng),以免軟化變性)
3.加入5ML雙抗,37度,5分鐘
注意:PBS沖洗兩次
4.加入雙抗2ML,室溫5分鐘
注意:PBS沖洗兩次
5.加入培養(yǎng)液10ml 雙抗2ML 6小時(shí)后換液
6.重新加入培養(yǎng)液雙抗?jié)舛入S污染情況調(diào)整,連續(xù)5-7天
7.對(duì)于培養(yǎng)箱需要*全面消毒
8.碘伏消毒作用10分后酒精消毒10分鐘,重復(fù)兩次
9.紫外照射一小時(shí)
污染的原代細(xì)胞因?yàn)槭窃?,根本沒(méi)有凍存,上述方法處理后傳到第3代,在后來(lái)的激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)沒(méi)有見(jiàn)到細(xì)胞形態(tài)異常。
供前列地爾 見(jiàn)標(biāo)示量 前列腺素A1 -20℃,避光 *: 規(guī)格:
供前列地爾 見(jiàn)標(biāo)示量 前列腺素B1 -20℃,避光 *: 規(guī)格:
供鮭降鈣素 2mg N-乙酰-半胱氨酸1-鮭降鈣素 密封,4℃保存 *: 規(guī)格:
供醋酸奧曲肽 2mg 脫蘇氨醇8奧曲肽 密封,4℃保存 *: 規(guī)格:
553/380fmol 游離甲狀腺素 *: 規(guī)格:
552/362fmol 游離三碘甲狀腺原氨酸 *: 規(guī)格:
效價(jià)測(cè)定 約2.5g 洋地黃 2-8℃,避光 *: 規(guī)格:
效價(jià)測(cè)定 約30mg 垂體后葉 2-8℃,避光 *: 規(guī)格:
效價(jià)測(cè)定 20mg/支 胰島素(豬) -20℃,避光 *: 規(guī)格:
原代細(xì)胞
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